Devido a crescente importância dos coccídios intestinais (Cryptosporidium, Isospora e Cyclospora) como parasitos oportunistas, é fundamental para os laboratórios diferenciar morfologicamente estes protozoários; a técnica de Ziehl-Neelsen modificada (ZNm) é amplamente utilizada para este fim; recentemente, foi proposto um novo procedimento, a coloração combinada do ácido tricrômico (Acid-Fast-Trichrome - AFT). O objetivo do presente estudo foi comparar os processos AFT e ZNm para a detecção destes coccídios em amostras fecais de pacientes portadores do vírus VIH. Foram selecionados dois grupos de indivíduos, para inclusão no estudo, segundo a presença (n=60) ou ausência de diarréia (n=60). As amostras de fezes foram coletadas em solução de formalina 10% e os esfregaços fecais preparados i) diretamente das fezes e ii) após concentração prévia a 500xg (10 minutos), foram submetidos aos diferentes processos de coloração. Considerando-se a positividade por técnica (AFT e ZNm), verificou-se a superioridade do procedimento de ZNm (n=19; 100% dos casos positivos) sobre o de AFT (n=8; 42,1%). Ambos possibilitaram a identificação dos 101 casos verdadeiramente negativos. Coccidiose intestinal foi mais frequente entre os pacientes que apresentaram diarréia (26,6%) em comparação à positividade observada entre os indíviduos assintomáticos (5%) sendo que C. cayetanensis não foi detectada em ambos os grupos. Foi de nosso interesse avaliar a aplicabilidade da técnica AFT para a coloração deste protozoário. Devido à sensibilidade e especificidade obtida neste estudo (100%), conclui-se que o método de ZNm continua sendo o mais indicado para o diagnóstico da criptosporidiose e isosporose, principalmente quando associado ao procedimento de centrífugo-concentração (500xg, 10 minutos). Embora a coloração AFT tenha baixo custo, faz-se necessário o seu aperfeiçoamento pois este procedimento permite o diagnóstico simultâneo dos coccídios intestinais (C. parvum, I. belli e C. cayetanensis) e dos microsporídios.

Due to the importance of Cryptosporidium parvum, Cyclospora cayetanensis and Isospora belli as opportunistic parasites, it is essential for laboratories to morphologically differentiate these coccidia. Among the recommended methods for diagnosis of C. parvum and I. belli is the Modified Ziehl-Neelsen stain (MZN) and recently a new technique, the Acid-Fast-Trichrome (AFT) was proposed. The purpose of this study was to compare the AFT and MZN techniques regarding the detection of C. parvum and I. belli oocysts in stool samples of HIV-positive patients. According to the presence (n=60) or absence of diarrhea (n=60), two groups were selected for inclusion in this study. The stool samples were collected in 10% formalin solution and the pellets, obtained without and after centrifugation-concentration (500xg; 10 min), were submitted to both stain techniques. Considering the positivity of the techniques (AFT and MZN), we observed the superiority of MZN stain (n=19; 100% positive cases) over AFT (n=8; 42.1%). The identification of the 101 truly-negative cases was possible with both techniques, but when the AFT stain was used, the oocysts showed a variable inner stain degree, which resulted in false-negatives. Enteric coccidiosis was more frequent among the patients who presented diarrhea (26.6%) compared to asymptomatic individuals (5%); C. cayetanensis was not detected in these groups. We were interested in evaluating the employment of AFT for the Cyclospora oocyst stain. Based on the sensitivity and specificity obtained in this study (100%), we concluded that the MZN technique is still the most indicated for routine use in clinical analysis laboratories, for the diagnosis of cryptosporidiosis and isosporosis, especially when it was used together with the centrifugation procedure (500xg; 10 min). Our results showed that with some improvements, AFT would be a simple and inexpensive technique appropriate for use in the diagnosis of intestinal coccidia (C. parvum, C. cayetanensis and I. belli). It can also be extended to the detection of microsporidia.

Estudou-se as prevalências de Gíardia duodenalís e Cryptosporidium parvum, conforme sexo e faixa etária. em crianças de 2-60 meses (n = 310), atendidas em 8 creches. Giardiose ocoireu em 42 (13,5%) das crianças e foi mais freqüente na faixa etãria de 19-24 meses, embora crianças nos primeiros seis meses de vida apresentassem amostras fecais positivas. Teste estatístico não revelou associação entre sexo e parasitismo (p > 0,05). C. parvum foi encontrado em 20 crianças (6,4%) com maior frequência no grupo de 7-12 meses. Crianças entre 25-30 meses e acima de 36 meses não apresentaram oocistos nas fezes. Oocistos foram detectados em 4 crianças na faixa etãria de 0-6 meses. Não houve significância estatística entre criptosporidiose e sexo (p = 0,09) e, entre creches (p = 0,068). Ocorreu associação entre idade e a presença do coccídio (p = 0,004). Abordou-se os aspectos epidemiológicos por meio de inquérito familiar, exames parasitolõgicos entre contatos dos casos-índices e dos animais presentes no domicílio. Prevalência de C. parvum foi maior quando pelo menos um dos pais era profissional da Área de Saúde (73,6% positivas), hai:ia relato de doença concomitante (52,6%) positivas) e diairéia era o principal sintoma por ocasião de exame fecal (78,9%) positivas). Exames de fezes dos animais domésticos foram negativos para estes dois parasitos.

The prevalence of the Giardia duodenalis and Cryptosporidium parvum infections were studied in children 2-60 months old (n = 310) grouped to sex and age, enrolled in 8 day-care centers. Giardiosis was found in 42 (13.5%) of the children and, was most frequent in the age group corresponding to 19- 24 months old although children at the first six months of life also presented positive faecal samples. Statistical analysis indicated no association between sex ip > 0,05) and prevalence for Giardia infection. C. parvum was detected in 20 (6.4%) of the children. Children seven to twelve months old showed the greatest prevalence of this parasite. There were not oocysts in the stools from the children 25-30 months and from those older than 36 months. Oocysts were detected in 4 children from the 0-6 months old group. There was no significative difference on sex (p = 0,09) and day-care facility (p = 0,068) for C. parvum infection while age was associated with infection (p = 0,004). Epidemiological aspects were studied by familiar inquiry, by parasitological examinations of stools from the contact- members of each case and from animals present at the residence. Prevalence for C. parvum was higher when at least one of the parents was a professional in the Human Health Centers (73.6% positives), when there was report of concomitant disease (52.6%positives) and when diarrhoea was the main symptom at the collection of the faecal specimens (78.9% positives). Faecal examinations of the domestic animals were negatives for these two parasites.